Enzymatische Analysen und Enzymkinetik

Zielgruppe

Technische und wissenschaftliche Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter mit biochemischen Grundkenntnissen

Inhalte/Lernziele

Enzymatische Aktivitätstests spielen eine wichtige Rolle in der Biochemie, Biotechnologie und medizinischen Diagnostik. In diesem Kurs werden Messtechniken und Testsysteme für verschiedene Enzymaktivitäten sowie Beispiele zur Bestimmung verschiedenster zellulärer Metabolite vorgestellt, gefolgt von einer Einführung in die Entwicklung solcher Test- und Messsysteme (u. a. einfache und gekoppelte optische Tests, Umsetzung chromo- und fluorogener Substrate). Faktoren, die die Enzymaktivität und -stabilität während der Isolierung, der Lagerung sowie während des Aktivitätstests selbst beeinflussen, werden behandelt und Fehlerquellen bei der Durchführung solcher Messungen aufgezeigt. Breiten Raum nehmen auch enzymkinetische Analysen und die praxisorientierte Erarbeitung des zugehörigen theoretischen Hintergrunds ein (Michaelis-Menten-Gleichung, Inhibitionstypen, allosterische Interaktion etc.). Anhand eigener photometrischer und fluorimetrischer Messungen im Praxisteil sowie durch Übungen zur Auswertung experimenteller Primärdaten wird dieses Wissen vertieft.

Themenschwerpunkte

Enzymatische Aktivitätstests, quantitative Metabolitenbestimmung, Enzymkinetik, Enzymaktivität und -stabiltät