Molekularbiologie Basiskurs

Zielgruppe

Zielgruppe Einsteiger in die molekularbiologischen Techniken, wie Diplomanden, Doktoranden, Technisches Personal, sowie Quereinsteiger

Inhalte/Lernziele

Dieser Kurs wird Ihnen einen Einstieg in die molekularbiologischen Techniken geben. Im ersten Teil werden wir ausgehend von genomischer DNA ein Genfragment durch Polymerasekettenreaktion (PCR) amplifizieren, mit Restriktionsenzymen verdauen und in einen Vektor ligieren. Dazu werden folgende Methoden angewandt: Plasmid-Präparation, Photometrische DNA-Bestimmung, PCR, Agarosegelelektrophorese, Gelextraktion von DNA, Restriktionsverdau, Dephosphorylierung und Ligation von DNA, Herstellung kompetenter Bakterien und deren Transformation, blau/weiß Selektion über LacZ-Gen, Überprüfung der Klonierung mittels PCR und Restriktionsanalyse. Im zweiten Teil werden wir uns mit der Proteinbiochemie beschäftigen. Hierzu wird ein Proteinlysat hergestellt, die Proteinkonzentration bestimmt und das Gemisch über eine SDS Polyacrylamidgelelektrophorese (SDS-PAGE) getrennt. Anschließend werden die Proteine aus dem Gel auf eine Membran geblottet und mittels Antikörpern detektiert (Western Blot). Die Eigenschaften von DNA und Proteinen, ihre Lokalisierung, Produktion und Handhabung werden theoretisch sowie praktisch besprochen.

Themenschwerpunkte

Eigenschaften von DNA und Proteinen, Klonierung, PCR, SDS-PAGE, Western Blot, Antikörper

Empfohlene Aufbaukurse

Trouble Shooting in der Molekularbiologie, Southern-Blot Labor-Kompaktkurs, Northern Blot Labor-Kompaktkurs, Western Blot Labor-Kompaktkurs, Klonierungsstrategien