Proteinreinigungs- und Analysemethoden
Zielgruppe
Technische und wissenschaftliche Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter mit soliden Grundkenntnissen in der Molekular- und Zellbiologie
Inhalte/Lernziele
Der Begriff Proteomics umfasst die Erforschung des Proteoms, d. h. der Gesamtheit aller in einer Zelle oder einem Lebewesen exprimierten Proteine. Kritisch für ein aussagekräftiges Ergebnis in der Proteomforschung ist eine gezielte Probenvorbereitung, die jedoch häufig unterschätzt wird. Ziel des Kurses ist daher die Vermittlung unterschiedlicher Techniken der Probenvorbereitung für die Proteomanalyse und das Erlernen der verschiedenen Grundoperationen zur reproduzierbaren Aufarbeitung von Proteinproben aus Körperflüssigkeiten, Zellkulturen, Bakterien, Hefen und Geweben. Vermittelt werden hierbei u. a. Kenntnisse über:
- Proteinextraktionen (z. B. subzelluläre Organellen)
- Depletion von abundanten Proteinen
- Analyse von posttranslationalen Modifikationen (PTMs)
- Probenvorbereitung für zweidimensionale Gelelektrophorese
- Massenspektrometrie und immunologische Analysetechniken (Western Blot Analysen, ELISAs, Arrays)
- Chromatographische Anreicherungen von Proteinfraktionen
Themenschwerpunkte
Proteinextraktion und Aufarbeitung von Proteinproben aus verschiedenem Material, Probenvorbereitung für klassische Analysemethoden, Massenspektrometrie
Empfohlene Aufbaukurse
2D Gelelektrophorese, Protein- und Peptidanalytik mit MALDI-TOF MS, Glykoproteinanalyse