RNA Interferenz

Zielgruppe

Der Kurs ist sowohl für Anfänger mit Vorkenntnissen in Zellkultur und molekularbiologischen Arbeitstechniken als auch für Fortgeschrittene geeignet.

Inhalte/Lernziele

Dieser Kurs vermittelt zum einen ein theoretisches Basiswissen und erweitert zum anderen praktische Grundkenntnisse, damit Sie die Effizienz von Genausschaltungsexperimenten durch gezielte Design Algorithmen und praktische Arbeitstechniken optimieren können. Wichtig sind hier vor allem verbindliche Kontrollen, welche für die Vergleichbarkeit der Ergebnisse absolut notwendig sind. Im Praxisteil werden u. a. folgende Themen behandelt:

• Design eines adäquaten RNAi Experiments für die Durchführung in verschiedenen Organismen und Zelltypen
• Design der dsRNA, siRNA, shRNA oder miRNA nach den neuesten -Design Algorithmen zur Optimierung der Genausschaltungseffizienz
• Design von adäquaten Kontrollexperimenten
• In vitro Transkription von siRNAs und dsRNAs für transiente RNAi Experimente,
• Herstellung von shRNA und miRNA exprimierenden Vektoren für permanente RNAi Experimente
• Transfektion und Einführung der o. g. dsRNA Spezies in Zellkulturen
• Tipps zur Anwendung von RNAi in ganzen Organismen
• Auswertung der Experimente

Themenschwerpunkte

Design und praktische Herstellung der dsRNAs, siRNAs, shRNAs und miRNAs, Anwendung in Zellkulturen und Organismen, zielgerichtete Auswertung der Experimente