PCR und Real Time PCR Trouble Shooting

Inhalte & Lernziele

Ziel des Kurses ist es, anhand ausgewählter Beispiele aus Ihrer täglichen Laborarbeit, Schwierigkeiten in den folgenden Bereichen zu analysieren und gemeinsam nach Lösungen zu suchen:

• Template-Präparation: DNA, RNA und cDNA
• PCR und real time PCR Optimierung
• Analytik der PCR Produkte

Um Ihre aktuellen Probleme und Fragestellungen aus Ihrer Praxis in den Kurs einzubringen werden die Inhalte und Themen des Kurses erst im Vorfeld mit Ihnen besprochen und festgelegt. Die Diskussion eigener Labordaten ist dabei ausdrücklich erwünscht. Selbstverständlich ist die Geheimhaltung der Daten gewährleistet und entsprechende Vereinbarungen können unterzeichnet werden.

Im allgemeinen theoretischen Teil werden u.a. folgende Themen behandelt:

• Schwierigkeiten bei den template-Präparationen: Inhibitoren, Mengen
• Methoden zur Vermehrung der template Menge vor der PCR
• Kontrollen
• Erstellung der Standardkurve: Stabilität, Genauigkeit und Exaktheit der Werte
• Detektionsformate
• Primer-Datenbanken und Primer-Design
• Verschiedene Elektrophorese-Systeme

Zielgruppe

Technische und wissenschaftliche Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter mit Grundkenntnissen in der Molekularbiologie, die die PCR-Methodik in ihrem Labor optimieren möchten.

Dozent

Dr. Johannes Becker-Follmann studierte Biologie und Philosophie in Saarbrücken und Freiburg. Er promovierte am Institut für Humangenetik und Anthropologie über “Vergleichende Genkartierungen bei Mensch und Maus“. Nach Forschungsaufenthalten in Osaka/Japan, Freiburg und Berlin gründete er im Frühjahr 2000 das Institut für Polymorphismus und Mutationsanalytik Deutschland in Homburg/Saar, das sich hauptsächlich mit der Analyse von DNA verschiedener Spezies beschäftigt. Seit 2002 führt er Schwerpunktseminare und Workshops zu PCR-Themen durch.