Enzymatische Analysen und Enzymkinetik

Inhalte & Lernziele

Enzymatische Aktivitätstests spielen eine wichtige Rolle in der Biochemie, Biotechnologie und medizinischen Diagnostik. In diesem Kurs werden Messtechniken und Testsysteme für verschiedene Enzymaktivitäten sowie Beispiele zur Bestimmung verschiedenster zellulärer Metabolite vorgestellt, gefolgt von einer Einführung in die Entwicklung solcher Test- und Messsysteme (u.a. einfache und gekoppelte optische Tests, Umsetzung chromogener und fluorogener Substrate). Faktoren, die die Enzymaktivität und -stabilität während der Isolierung, der Lagerung sowie während des Aktivitätstests selbst beeinflussen, werden behandelt und Fehlerquellen bei der Durchführung solcher Messungen aufgezeigt. Breiten Raum nehmen auch kinetische Analysen und die praxisorientierte Erarbeitung des zugehörigen theoretischen Hintergrunds ein.

Im theoretischen Teil werden u.a. folgende Themen behandelt:

• Aktivität und Stabilität von Enzymen
• Enzymatische Tests und Messtechniken
• Quantitative Bestimmung von Metaboliten
• Enzymkinetik (Michaelis-Menten-Gleichung)
• Inhibitionen (Inhibitor-Konstante und IC50)

Der praktische Teil umfasst:

• Photometrische und fluorimetrische Messungen
• Enzymkinetische Messungen
• Enzymatische Aktivitätstests
• Quantitative Bestimmung von Metaboliten

Zielgruppe

Technische und wissenschaftliche Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter mit biochemischen Grundkenntnissen.

Dozent

PD Dr. Wulf Plaga studierte in Konstanz und Heidelberg Biologie und promovierte am Institut für Biologische Chemie in Heidelberg. Von 1989 bis 1991 war er Forschungsstipendiat am Max-Planck-Institut für Biochemie in Martinsried. Anschließend war er als wissenschaftlicher Angestellter am ZMBH in Heidelberg tätig und habilitierte 2000 an der Fakultät für Biologie der Universität Heidelberg (Venia legendi für Molekularbiologie). Seit 2000 ist er als Privatdozent an der Universität Heidelberg tätig.