Chemotaxis adhärenter Säugerzellen

Inhalte & Lernziele

Die gerichtete Bewegung von Zellen in Konzentrations-Gradienten (Chemotaxis) ist ein wichtiger Prozess in vielen Bereichen der Biologie wie z.B. der Onkologie, Neurologie und Immunologie. Chemotaxis spielt bei der hämatogenen Metastasierung ebenso eine Rolle, wie bei der Angiogenese und Acquise von Immunzellen in entzündetem Gewebe. In vitro Chemotaxis-Assays sind dementsprechend ein wichtiger Bestandteil biomedizinischer Forschung.

Im Kurs werden in Theorie und Praxis am Beispiel langsam migrierender Säugerzellen (HUVEC, HT1080) Aufbau, Handhabung und Einsatzmöglichkeiten eines Chemotaxis-Assays gezeigt. Der praktische Teil orientiert sich an einer Kammer für langzeitstabile, lineare Gradienten mit Zugang zu optischen Auswertungen mittels Phasenkontrast- und Fluoreszenz-Mikroskopie. Durch die Möglichkeit der Mikroskopie können neben der Zellbewegung auch Aussagen u.a. über Morphologie, Zell-Zell-Interaktion und Polarisation gemacht werden. Zusätzlich können biomolekulare Prozesse in der Zelle während der Migration analysiert werden.

Im theoretischen Teil werden u.a. folgende Themen behandelt:

• Physikalische Grundlagen (Diffusion, Gradient, Sensitivität von Zellen)
• Übersicht chemotaktischer Assays und deren Anwendung
• Auswertung und Darstellung generierter Migrationsdaten
• Parameter zur Charakterisierung ungerichteter und gerichteter Zellbewegung

Im praktischen Teil werden folgende Schwerpunkte erarbeitet:

• Durchführung eines Beispielexperiments mit HUVEC oder HT1080
• Videomikroskopie und tracking von Zellen
• Analyse von Migrationsdaten

Zielgruppe

Technische und wissenschaftliche Mitarbeiterinnen und Mitarbeiter mit soliden Grundkenntnissen in Zellbiologie und Zellkultur, die chemotaktische Experimente mit Zellen im Labor etablieren möchten.

Dozent

Elias Horn studierte Biotechnologie an der Fachhochschule Mittweida. Seit 2004 arbeitet er bei der ibidi GmbH im Bereich Forschung und Entwicklung an der Umsetzung von kundenspezifischen Trägern für in vitro Zellkulturexperimente. Er leitet die Entwicklung chemotaktischer Assays bei ibidi.